Équipe François RASSENDREN
Signalisation purinergique et inflammation du cerveau
Projet Développement de biosenseurs pour la caractérisation de l’inflammation
RESPONSABLE
Personnel IGF impliqué
François RASSENDREN
DR CNRS
Nathalie LINCK
AI UM
Negar AHMADI
Doctorante CNRS
Valentin GARCIA
Doctorant INSERM
Paola NOBILI
IR INSERM
Notre thématique de recherche est centrée sur les mécanismes cellulaires de l’inflammation. Grâce au développement de différents biosenseurs et en combinant l’utilisation de vecteurs viraux et l’utilisation d’animaux transgéniques, notre objectif est de pouvoir caractériser dans le temps et dans l’espace des évènements clefs de l’inflammation comme la libération d’IL-1β ou d’ATP extracellulaire, en particulier dans le système nerveux central.
Biosenseurs pour les récepteurs ionotropiques et l’ATP
Nous avons développé des biosenseurs fluorescents ou bioluminescents permettant de suivre en temps réel l’activation de différents récepteurs ionotropiques. Ces outils sont basés sur la fusion des récepteurs avec des sondes luminescentes sensibles aux variations ioniques à proximité du pore. Ils sont compatibles avec différents types d’approches comme la microscopie ou le criblage cellulaire à haut débit.
L’application de cette stratégie aux récepteurs membranaires P2X nous a également permis de développer un senseur d’ATP suffisamment sensible pour détecter des concentrations de l’ordre de la nanomole d’ATP, faisant de ce capteur un outil de choix pour visualiser la libération extracellulaire d’ATP.
(A) Représentation schématique et principe du biosenseur à l’ATP. Suite à l’activation du récepteur P2X par l’ATP extracellulaire, une augmentation de la fluorescence de GCaMP6s est observée. (B) Détection de l’ATP extracellulaire en microscopie dans des neurones hippocampiques exprimant le biosenseur P2X-GCaMP6s
Principales publications
• Chappe., et al. (2022) PNAS, Nov 16;119(46).
• Chappe., et al. (2021) Mol Pharmacol, Sep;100(3).
• Ollivier., et al. (2021) eNeuro, Jan 28;8.
Financements
• 2020-2023 ANR CANALBRET – Partenaire
• 2021-2024 ANR DIAPASON – Coordinateur (F. Rassendren)
Collaborations
• Yann Percherancier (Bordeaux)
• Thomas Grutter (Strasbourg)
• Etienne Audinat (Montpellier)
• Patrice Mollard (Montpellier)
Alumni
• Matthias Ollivier (Thèse)
• Sandra Pierredon (IE)
Brevets
• Y. Percherancier, V. Compan, F. Rassendren, M. Ollivier, Y. Chappe. WO 2021185759A1, 2021.
Biosenseur pour l’IL-1β
L’interleukine -1β (l’IL-1β) est une cytokine pro-inflammatoire qui joue un rôle clef dans l’initiation de l’inflammation. Cependant, les techniques classiques utilisées pour détecter l’IL-1β (ELISA et WB) ne permettent pas de visualiser dans le temps et dans l’espace la synthèse et la maturation de cette cytokine. Grâce à la technologie BRET, nous avons développé un biosenseur permettant de suivre in situ (au niveau cellulaire et in vivo) et de façon dynamique la bioactivité de l’IL-1β, ouvrant de nouvelles perspectives dans la compréhension des différents rôles physiologiques et pathologiques de cette cytokine.
(A) Représentation schématique et principe du biosenseur de l’IL-1β.
(B) Détection du biosenseur de l’IL-1β chez des souris, en condition basale (1) ou suite à l’induction d’une inflammation (2).
Principales publications
• Compan et al, (2023) Methods Mol Biol . 2696:47-53.
• Moutin., et al. (2020) Front. Synaptic Neurosci., 12:19.
• Compan et al. (2012) J. Immunol. 189:2131-7.
Financements
• 2019-2023 ANR NIFLURIL – Coordinateur
• 2022-2025 ANR 2020-MICROFLAMEAT – Partenaire
• 2023-2026 ANR 2020-INFLAMMANUP – Partenaire
Collaborations
• Alexandre Bennani (Dijon)
• Nathalie Ahrel (Montpellier)
Alumni
• Vincent Seube (Thèse)
• Eva Goetz (M1)
• Maxime Bonnet (M2)
• Anne-Laure Hemmonot (M1)
Signalisation purinergique et inflammation
L’ensemble des biosenseurs développés dans le laboratoire nous permettent de décrypter les mécanismes cellulaires de l’inflammation. En particulier, notre travail s’intéresse au rôle de la signalisation purinergique et du canal anionique VRAC dans l’activation de l’inflammasome NLRP3.
Mécanismes d’activation de l’inflammasome NLRP3 lors de l’inflammation articulaire causée par la présence de microcristaux dans l’articulation.
Principales publications
• Martin-Sanchez et al, (2023).J Cell Biol .;222(8).
• Baroja-Mazo A et al, (2019). Sci Rep.;9(1).
Financements
• 2022-2025 ANR CRYSTAL-IN – Partenaire
Collaborations
• Christophe Duranton (Nice)
• EA Hang-Korng (Paris)
Alumni
• Matthias Ollivier (Thèse)
